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新型聚合物凝膠 可在三維空間中培養(yǎng)細胞
2015-11-26  來源:中國聚合物網(wǎng)

嵌段共聚物在冷凍時卷成球狀分散在液態(tài)水中(上圖)。當溫暖時,球體融合為長蠕蟲狀,相互作用形成柔軟的水凝膠(下圖),足夠支撐三維細胞培養(yǎng)。

(來源:Biomacromolecues)

生物學家們有了一種新的易變蛋白質(zhì)凝膠替代物,用于在三維空間中培養(yǎng)細胞:一種聚合物凝膠不僅可支撐細胞生長,而且當溫度降低時,很容易地從凝膠態(tài)轉(zhuǎn)換為液態(tài),方便細胞收集。(Biomacromolecules 2015, DOI: 10.1021/acs.biomac.5b01266).

在2012年英國考文垂的一次講座中,哈佛大學的George M. Whitesides教授想出了動物蛋白質(zhì)基水凝膠的一種合成替代物,比如用于三維生長細胞的Matrigel基質(zhì)膠。三維基體生長的細胞比二維細胞能更好地代表體內(nèi)組織。蛋白質(zhì)基凝膠的批次重現(xiàn)性差,Whitesides教授說,細胞生物學家需要每次都具有相同細胞生長環(huán)境的水凝膠。

謝菲爾德大學Steven P. Armes的研究小組剛剛制備了溫度響應(yīng)的合成凝膠,他意識到這種凝膠可能會是現(xiàn)有Matrigel基質(zhì)膠的替代品。

后來他們開始合作研究新的凝膠是否會支撐三維細胞培養(yǎng)。

Arme的凝膠是嵌段共聚物構(gòu)成,共價鍵連接的兩種不同聚合物:聚甘油單甲基丙烯酸酯(PGMA)和聚2-羥丙基丙烯酸酯(PHPMA)。PGMA是水溶性,而PHPMA是疏水性。在水中,鏈的疏水端聚集在一起,根據(jù)溫度的不同變換形狀。在冰箱溫度(4°C),共聚物形成球形納米粒子,在水中保持懸浮。在室溫(25°C)以上,球形粒子融合形成非常長的蠕蟲狀結(jié)構(gòu),纏結(jié)形成柔軟的水凝膠。從溫暖時的凝膠到冷卻后的液態(tài)轉(zhuǎn)變是完全可逆的。研究人員很快發(fā)現(xiàn)這種低成本的聚合物會形成無需動物蛋白的均勻凝膠,對于一些應(yīng)用是必需的,如人體醫(yī)療。此外,研究人員可以通過降低溫度恢復(fù)支架上的細胞,從而避免破壞性酶的使用。

為了測試這種“蠕蟲凝膠”,Whitesides教授研究小組將蠕蟲狀凝膠和老鼠肺癌細胞一同嵌入到,聚酯網(wǎng)中間的厚聚氯乙烯片。當細胞在三維膠體中生長時,細胞通過透氣網(wǎng)接觸空氣和營養(yǎng)物質(zhì)。

最初測試后,該團隊需要一種更強的凝膠。于是,聚合物化學家們將二硫基加入到水溶性鏈中,最終引起鄰近蠕蟲凝膠的結(jié)合并強化凝膠。

在二硫基強化的凝膠中,細胞生長了12天,即使沒有任何生長因子和Matrigel基質(zhì)膠中的粘附蛋白。12天之后,通過在冰箱中冷藏蠕蟲狀細胞一個小時,研究者們恢復(fù)了91%的細胞。而生長在Matrigel基質(zhì)膠中的細胞需要降解酶清洗來恢復(fù)所有細胞。

華盛頓大學的Buddy D. Ratner仍舊不看好用這種凝膠來取代Matrigel基質(zhì)膠,但認為它簡單的熱可逆性和可預(yù)測性結(jié)構(gòu)可能會有助于組織工程和癌癥研究。

Armes和他的研究團隊正在設(shè)計新一代蠕蟲凝膠,不僅應(yīng)用于細胞培養(yǎng),還可用于其他生物學需要。“我們只是需要更多的細胞生物學家告訴我們他們所遇到的問題,這樣我們可以試著解決這些問題,”他說。 

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